免疫治療已成為肺癌患者重要的治療手段。PD-L1表達(dá)是最為常用的免疫治療療效預(yù)測標(biāo)志物。PD-L1的檢測主要依賴于對腫瘤組織的獲取，但對于晚期轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者，尤其經(jīng)治耐藥患者，侵入性穿刺活檢獲得腫瘤組織的比例往往較難實現(xiàn)。因此，通過液體活檢技術(shù)檢測療效預(yù)測標(biāo)志物是尚未被滿足的臨床需求。檢測癌癥患者外周血中的循環(huán)游離腫瘤DNA（ctDNA）已被廣泛用于晚期惡性腫瘤患者的靶向治療與動態(tài)監(jiān)測。但ctDNA用于評估免疫治療療效及患者預(yù)后仍需要更多證據(jù)積累?；谠撐幢粷M足的臨床需求，艾德生物攜手山東省腫瘤醫(yī)院王哲海教授探索了ctDNA在信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療NSCLC療效中的臨床價值，尤其是短期ctDNA動態(tài)變化在療效預(yù)測中的價值。研究成果近日發(fā)表在免疫治療國際知名學(xué)術(shù)期刊Journal for ImmunoTherapy of Cancer（JITC）上（IF：12.5）。
主要研究結(jié)果：
1）治療6周（兩個治療周期）后ctDNA陰性的患者腫瘤負(fù)荷顯著減小，而大多數(shù)6周ctDNA陽性的患者腫瘤負(fù)荷增加。
2）治療6周（兩個治療周期）后ctDNA陽性患者預(yù)后更差，即無進(jìn)展生存期（PFS）（91 vs NR天; p<0.0001）和總生存期（OS）（47 vs 467天; p=0.0039）顯著縮短。
3）治療6周（兩個治療周期）后ctDNA中主克隆清除且無新克隆突變形成的患者具有更長的PFS（mPFS 266 vs 89天，p=0.003)。
4）治療6周（兩個治療周期）后ctDNA殘留是患者疾病進(jìn)展或死亡的獨(dú)立影響因素。
研究方法
該研究共入組了前瞻性隊列研究(ChiCTR1900027634)中的33例含鉑化療期間或治療后疾病進(jìn)展，或任何一線TKI不耐受/失敗的晚期NSCLC患者。入組患者接受多西他賽聯(lián)合信迪利單抗治療4-6周期，隨后進(jìn)行信迪利單抗維持治療直至疾病進(jìn)展或不可耐受。
在基線以及治療6周后（2個治療周期）采集兩次外周血，并采用艾德生物自主專利的ddCapture®技術(shù)對外周血中ctDNA進(jìn)行檢測（圖1）。
患者臨床反應(yīng)有完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、疾病穩(wěn)定(SD)和疾病進(jìn)展（PD），持久臨床獲益(DCB)患者定義為CR或PR或SD患者，無持久獲益（NDB）患者定義為6個月內(nèi)發(fā)生PD的患者。
圖1 研究設(shè)計和ctDNA采集時間點（A），
以及本研究患者篩選流程圖（B）
研究結(jié)果
患者特征及基線和6周ctDNA分析
入組的33例患者特征如表1，其中1例在基線ctDNA未檢出變異，32例患者ctDNA中共鑒定出236個體細(xì)胞突變，6周后有相應(yīng)配對ctDNA檢測的23例樣本中（圖2B），6例患者檢出8個新的基因突變，11例患者基線期檢出的25個基因突變消失，另外統(tǒng)計顯示共有37個基因在11例患者中再次發(fā)生突變(圖2A) 。
表1 患者特征
圖2 基線（A）和6周（B）時間點基因組改變圖譜
信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療NSCLC療效相關(guān)的分子特征
27例經(jīng)RECIST 1.1標(biāo)準(zhǔn)評估的患者納入進(jìn)一步分析。分別比較了8例DCB和19例NDB患者，以及8例CR/PR和19例SD/PD患者之間的基因改變（圖3A-B）。單因素和多因素分析結(jié)果顯示MAGI2突變可能是一個與疾病進(jìn)展相關(guān)的獨(dú)立危險影響因子（圖3C）。
圖3 信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療NSCLC
療效相關(guān)的分子特征
ctDNA狀態(tài)與信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療療效相關(guān)性
為了尋找能夠更有效地預(yù)測信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療療效的生物標(biāo)志物，對bTMB和ctDNA狀態(tài)進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示6周ctDNA檢測陰性的患者腫瘤體積減小，而大多數(shù)6周ctDNA檢測陽性的患者腫瘤體積增加，且差異性顯著（圖4A）。隨后進(jìn)一步探討了動態(tài)監(jiān)測在治療中的潛在預(yù)測及預(yù)后價值。結(jié)果表明，ctDNA清除的患者更有可能從免疫治療中獲益(PR/CR)（圖4B），而bTMB變化程度及變化百分比與患者反應(yīng)無顯著相關(guān)性。6周ctDNA陽性患者無進(jìn)展生存期(PFS)（91 vs NR天; p<0.0001）和總生存期（47 vs 467天; p=0.0039）顯著縮短（圖4C），而基線ctDNA和基線bTMB與患者預(yù)后相關(guān)性沒有統(tǒng)計學(xué)差異。多變量Cox回歸顯示第6周ctDNA殘留為患者疾病進(jìn)展或死亡的獨(dú)立危險因素(HR=100 (95%) CI 4.10 ~ 2503.00)， p=0.005)（圖4E）。
對23例患者治療6周后ctDNA的克隆突變清除情況分析結(jié)果顯示：6周克隆突變清除且無新克隆突變形成的患者具有更長的OS (mOS 147 vs 467天，p=0.0048)和PFS(mPFS 89 vs 266天，p=0.003)（圖4D）。
圖4 6周ctDNA狀態(tài)與患者治療療效的相關(guān)性
病例展示：典型患者ctDNA與CT圖像動態(tài)改變
文章最后詳細(xì)展示了23例患者中具有代表性的7例患者ctDNA動態(tài)和CT影像的動態(tài)變化（圖5）。
圖5 7例監(jiān)測患者ctDNA和CT圖像
結(jié)論
該研究證實了短期的ctDNA（治療6周后）動態(tài)監(jiān)測，包括ctDNA狀態(tài)以及克隆突變的清除情況，可作為信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療NSCLC療效預(yù)測的生物標(biāo)志物。
原文鏈接：
https://jitc.bmj.com/content/10/12/e004952
專家點評山東省腫瘤醫(yī)院 王哲海教授：
由于外周血采集的無創(chuàng)性，ctDNA的檢測已經(jīng)成為指導(dǎo)患者靶向治療的一種常規(guī)檢測方法。然而ctDNA的檢測在免疫治療中的應(yīng)用價值尚待明確。
在這項研究中，我們?nèi)虢M了33例接受信迪利單抗聯(lián)合多西他賽二線治療NSCLC患者，并采集了這些患者的血液樣本進(jìn)行了ctDNA檢測。并且有22名患者同步采集了基線與兩個治療周期后的外周血樣本。這一設(shè)計為描述從基線到治療6周后的基因改變創(chuàng)造了很好的機(jī)會。
通過這一研究我們發(fā)現(xiàn)治療兩個周期后，既6周后的ctDNA清除情況是患者疾病進(jìn)展或死亡的獨(dú)立影響因素，且6周ctDNA清除與患者更好的PFS和OS顯著相關(guān)。此外，從克隆演化的角度，我們也看到那些療效欠佳的患者往往是主克隆未被清除或產(chǎn)生了更多新的亞克隆。那么這些患者的腫瘤特征是怎么樣的？對于這些6周ctDNA未清除的患者是否應(yīng)該采取更好的治療方案？對于這些問題未來無論在基礎(chǔ)研究還是臨床研究都值得設(shè)計及開展相應(yīng)的工作來進(jìn)一步探索回答。此外，bTMB變化可能可以預(yù)測患者治療反應(yīng)，但bTMB的改變與患者的長期生存相關(guān)性在本研究中并不顯著。這與目前國際上同類研究得到的結(jié)果相一致，也說明bTMB也許不是一個理想的免疫治療療效預(yù)測標(biāo)志物。
當(dāng)然，該研究也具有一定的局限性，需要設(shè)計更大規(guī)模免疫+化療 vs 化療的前瞻性研究去驗證ctDNA動態(tài)監(jiān)測的預(yù)測價值。
關(guān)于艾德生物（股票代碼：300685）
廈門艾德生物醫(yī)藥科技股份有限公司（股票代碼：300685）聚焦在腫瘤精準(zhǔn)醫(yī)療分子診斷領(lǐng)域，專注于科技惠民的技術(shù)創(chuàng)新，致力為患者提供合規(guī)、高品質(zhì)的診斷產(chǎn)品和服務(wù)，讓患者從精準(zhǔn)醫(yī)療中真正獲益。公司擁有國家企業(yè)技術(shù)中心、工信部專精特新小巨人企業(yè)、國家級制造業(yè)單項冠軍企業(yè)、博士后科研工作站、發(fā)改委基因檢測技術(shù)應(yīng)用示范中心、國家高新技術(shù)企業(yè)、福建省腫瘤高通量測序工程研究中心等資質(zhì)，GMP標(biāo)準(zhǔn)廠房獲得國家藥監(jiān)局（NMPA）和歐盟ISO13485資質(zhì)認(rèn)證；公司擁有ADx-ARMS?、Super-ARMS?、ddCapture?、ADx-HANDLE?等核心技術(shù)，核心技術(shù)獲得中國、美國、歐盟、日本授權(quán)，榮獲國家科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎二等獎、中國專利獎銀獎；公司產(chǎn)品覆蓋具備精準(zhǔn)醫(yī)療條件的各大癌種，多個產(chǎn)品至今尚無競品，除了在國內(nèi)三甲醫(yī)院大規(guī)模應(yīng)用外，部分產(chǎn)品在日本、韓國獲批上市并進(jìn)入當(dāng)?shù)蒯t(yī)保，開創(chuàng)了我國腫瘤伴隨診斷海外獲批的先例。此外，公司下設(shè)廈門艾德醫(yī)學(xué)檢驗所、上海廈維醫(yī)學(xué)檢驗所，擁有醫(yī)療機(jī)構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證、通過美國病理學(xué)會（CAP）認(rèn)證和ISO15189認(rèn)可，專業(yè)從事第三方臨檢服務(wù)。目前全球數(shù)十個國家和地區(qū)的客戶選擇了艾德產(chǎn)品和服務(wù)，每年有數(shù)十萬腫瘤患者從中受益。此外，公司瞄準(zhǔn)行業(yè)創(chuàng)新源頭，以伴隨診斷賦能原研藥物臨床，是眾多頂級藥企腫瘤藥物開發(fā)的戰(zhàn)略合作伙伴，是國際知名的民族品牌。